厭氧菌及棒狀桿菌鑒定卡由20個具干燥底物的小管組成，可用于測定酶活性和糖的發(fā)酵。酶活性測定將濃的菌懸液接種于干燥的酶底物，使其復溶。孵育過程中，所產生的代謝終產物通過自然反應或加入附加試劑而變色。發(fā)酵試驗將菌懸液接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基中(含pH指示劑)，使管內底物溶解。糖發(fā)酵結果由pH 指示劑的變化而測得。鑒定結果可根據說明書的判讀表進行讀出，也可參照生化譜檢索手冊或測定軟件，得到鑒定結果。

　　厭氧菌及棒狀桿菌鑒定卡程序性步驟：

　　1.菌落的選取，一旦要鑒定的菌株被分離并被證實為革蘭氏陽性、無芽孢形成、兼性需氧-厭氧桿菌桿菌：

　　1.1 記錄溶血類型

　　1.2 挑取一個分離較好菌落于0.3ml 的無菌水中制備均勻菌懸液。

　　1.3 用該懸液注入瓊脂平板中【Trypcase Soy 瓊脂＋5%羊血平板或哥倫比亞瓊脂（加或不加CAN）＋5%羊血平板上】(或用拭子涂布整個平板表面)。

　　1.4 37°C 孵育24 – 48 小時

　　2.試條的準備

　　2.1 準備一個培養(yǎng)盒（盤和蓋子），倒入約5ml 蒸餾水或去離子水【或任何不含添加劑或不含能產生揮發(fā)性氣體（如Cl2,CO2 等）的化學物質的水】于盤的蜂窩小凹中，造成一個濕室。

　　2.2 記錄菌株資料于盤的長邊上(不記在蓋上，因為操作過程中很容易將蓋子放到其它試條上)。

　　2.3 從包裝袋中取出試條。

　　2.4 置試條于培養(yǎng)盒中。

　　3.接種物的制備

　　3.1 按產品說明書中“警告和注意”所示，打開API 懸浮培養(yǎng)基安瓿。

　　3.2 用拭子收集所有先前準備好的傳代平板上的細菌。建議使用培養(yǎng)24-48 小時的新鮮菌。

　　3.3 制備菌懸液，濃度為6 個麥氏單位。菌懸液制備好后應立即使用。